Jawaban: Studi PK / PD menunjukkan ketersediaan hayati 100% di jantung, aorta dan ginjal. Ginjal merupakan satu-satunya jaringan yang terdapat indikasi akumulasi, berdasarkan pemeriksaan histologis dan data PK / PD. Pemberian dosis tunggal SRP-2001 menunjukkan bahwa PPMO dengan cepat dibersihkan dari jantung (dalam 2 jam), dibersihkan dari aorta dalam waktu 4 jam, tetapi dipertahankan di ginjal hingga titik waktu 48 jam. DdPCR kuantitatif menunjukkan aktivitas penghambatan sambungan samar G608G di semua jaringan kecuali kulit yang diuji sejauh ini (aorta, jantung, ginjal, hati, paha depan, tulang), meskipun aktivitas bervariasi tergantung pada jaringan.

Francis, Mike, dan Wayne

Jawaban:Mengenai pertanyaan tersebut, sejujurnya, saya tidak tahu jawabannya. Namun, pada orang dewasa biasa, kami tidak menghubungkan derajat kalsifikasi katup dengan asupan Mg / Ca, kalsifikasi yang lebih berat kemungkinan besar disebabkan oleh faktor-faktor lain.

Dr Pinak Shah

Jawaban: Saya setuju dengan pendapat Dr. Shah. Kemungkinan penyebab kalsifikasi katup pada HGPS berbeda dari yang kita lihat pada pasien usia lanjut. Saya juga tidak memiliki pengetahuan tentang metabolisme Ca dan Mg.

Francesco Musumeci

Jawaban: Lamin A / C null (Lmna^{- / -}) model tikus mengembangkan DCM disertai dengan hilangnya fungsi jantung. Selain itu, tikus ini menunjukkan cacat pada konduksi jantung dan fibrosis jantung ekstensif, dan kematian dini pada usia 5-8 minggu (Auguste et al., 2018; Frock et al., 2012; Sullivan, 1999). Namun, model tikus yang hanya kekurangan Lamin A (Fong et al., 2006) atau lamin C (Coffinier et al., 2010) tidak menunjukkan cacat jantung dan memiliki umur normal.

Referensi:
Auguste, G., Gurha, P., Lombardi, R., Coarfa, C., Willerson, JT, & Marian, AJ (2018). Penekanan Faktor Transkripsi FOXO yang Diaktifkan di Jantung Memperpanjang Kelangsungan Hidup pada Model Tikus Laminopati. https://doi.org/10.1161/CIRCRESAHA.117.312052

Coffinier, C., Jung, HJ, Li, Z., Nobumori, C., Yun, UJ, Farber, EA, Davies, BS, Weinstein, MM, Yang, SH, Lammerding, J., Farahani, JN, Bentolila, LA, Fong, LG, & Young, SG (2010). Sintesis langsung lamin A, melewati pemrosesan prelamin, menyebabkan inti cacat dalam fibroblas tetapi tidak ada patologi yang terdeteksi pada tikus. Jurnal Kimia Biologi, 285(27), 20818 – 20826. https://doi.org/10.1074/jbc.M110.128835

Fong, LG, Bergo, MO, Young, SG, Fong, LG, Ng, JK, Lammerding, J., Vickers, TA, Meta, M., Coté, N., Gavino, B., Qiao, X., Chang , SY, Young, SR, Yang, SH, Stewart, CL, Lee, RT, Bennett, CF, Bergo, MO, & Young, SG (2006). Prelamin A dan lamin A tampaknya dapat dibuang di lamina nuklir. Jurnal Investigasi Klinis, 116(3), 743 – 752. https://doi.org/10.1172/JCI27125.with

Rok, RL, Chen, SC, Da, D., Frett, E., Lau, C., Brown, C., Pak, DN, Wang, Y., Muchir, A., Worman, HJ, Santana, LF, Ladiges, WC, Rabinovitch, PS, & Kennedy, BK (2012). Ekspresi spesifik kardiomiosit dari lamin A meningkatkan fungsi jantung pada tikus Lmna - / -. PLoS ONE, 7(8), 1 – 9. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0042918

Sullivan, T. (1999). Hilangnya ekspresi lamin tipe-A membahayakan integritas selubung inti yang menyebabkan distrofi otot. Jurnal Biologi Sel, 147(5), 913 – 920. https://doi.org/10.1083/jcb.147.5.913

Pertanyaan: Dari Tom Misteli: Berapa lama pengobatan lonafarnib + tozilizumab pada hewan?
Jawaban: Kami melakukan percobaan pendahuluan pada hewan heterozigot mulai dari minggu ke 22 hingga minggu ke 30. Kami ingin memfokuskan pada kerangka waktu ini untuk mengevaluasi efek pada penambahan berat badan yang sebelumnya diamati dengan tocilizumab.

Pertanyaan: Dari Sgonzalo: Beautiful story Giovanna and Sammy !!! Apakah Anda melihat efek samping pengobatan tocilizumab? Atau fenotipe apa pun yang tidak membaik pada tikus progeria? Kepada Dr.Govanna Lattanzi: Pertanyaan: Dari tom misteli: berapa lama pengobatan lonafarnib + tozilizumab pada hewan?
Jawaban: Terima kasih Susana. Tidak, kami tidak melihat efek samping dari tocilizumab. Di antara fenotipe yang diperiksa (kifosis, distrofi jaringan adiposa, cacat rambut dan kulit, aktivitas lokomotor, lesi aorta dan hipertrofi miokardium) ditunda / diperbaiki.

Komentar: Dari MARIE GERHARD-HERMAN: Juga digunakan di AS untuk penyakit rheumatologist dan vaskulitis
Balasan: Terima kasih Marie atas info menarik ini tentang penggunaan vaskulitis.

Komentar: Dari PC Stefano: Tocilizumab juga disetujui di Jepang untuk mengobati penyakit Castleman tanpa efek imunosopresif
Balasan: Terima kasih Stefano untuk info ini.

Pertanyaan: Dari Delphine Larrieu: apakah Anda melihat adanya penurunan kerusakan DNA pada pengobatan progerinin dalam sel HGPS / model tikus HGPS?
Jawaban: Kami mengamati bahwa gen terkait perbaikan DNA (BRCA1, Rad51, dll) diubah setelah pengobatan dengan progerinin.

Pertanyaan: Dari Delphine Larrieu: Bagaimana cara kerja progerinin di Werner
Sindrom yang - sejauh yang saya tahu - tidak mengekspresikan progerin? Apakah molekul tersebut memiliki target lain?
Jawaban: Sel WS juga dapat menghasilkan sejumlah kecil progerin seperti pada usia normal
sel. Kami mengamati ekspresi progerin dalam sel WS pada tingkat mRNA.
Menurut kami protein WRN dapat berfungsi untuk menghambat progerin. Namun, di
kasus pasien WS, karena tidak ada protein WRN, ekspresi progerin adalah
diperkirakan terjadi di usia 20-an dan 30-an, seperti yang terlihat pada usia normal
orang.

Pertanyaan: Dari Bob Bishop: Apakah situs pengikatan progerinin didefinisikan secara biokimia atau
secara struktural? Apakah ada uji biokimia untuk menemukan senyawa tambahan
dengan mekanisme ini?
Jawaban: Kami melakukan uji tarik turun biotin-avidin bead dan mengamati
interaksi spesifik perogerinin dengan progerin tetapi tidak dengan Lamin A, Lamin
B, p53, atau emerin.
Kami juga melakukan uji Elisa untuk menemukan senyawa tambahan yang bisa
menjadi penghambat pengikat progerin / lamin A. Protein rekombinan progerin diinkubasi secara berurutan dengan pustaka kimia dan lamin A.
Namun, progerinin adalah bahan kimia paling efektif dalam bahan kimia
Perpustakaan.

Pertanyaan: Dari John Cooke: Kemajuan besar Dr. Kim. Apakah Progerinin mengurangi
sekresi sitokin SASP?
Jawaban: Kami mengamati bahwa progerinin dapat mengurangi ekspresi IL6 dan IL8
Sel HGPS.

Pertanyaan: Dari Susan Michaelis: apakah progerinin tersedia untuk peneliti?
Jawaban: Tentu saja, ini tersedia jika Anda memintanya.

Pertanyaan: Dari Thomas W Glover: Saya mungkin melewatkannya, tetapi menurut Anda apa itu
mekanisme yang bertanggung jawab atas efek menguntungkan pada sindrom Werner?
Jawaban: Sel yang diturunkan dari pasien WS juga menghasilkan sejumlah kecil progerin, sebagai
sebanyak sel normal yang berasal dari orang tua. Progerinin juga bisa
efektif dalam sel WS dengan mengurangi ekspresi progerin.

Jawaban: Terima kasih atas pertanyaannya: Tidak, bukan peradangan itu sendiri. Sebagian terkait dengan peradangan, kami telah mempelajari makrofag dalam proyek ini dan menemukan KO itu Saya rasa dalam meningkatkan pengeluaran kolesterol makrofag, baik basal dan ApoAI- dan HDL-terstimulasi. Karena efek ini kadang-kadang dikaitkan dengan peningkatan transportasi kolesterol terbalik in vivo, kami ingin menentukan apakah Saya rasa penghambatan akan mengurangi perkembangan aterosklerosis.

Pertanyaan: Dari vandres: sudahkah Anda mencoba koreksi DNA pada fibroblas HGPS manusia dari berbagai usia (in vitro) dan menguji normalisasi fenotipe mereka untuk melihat apakah itu menurun seiring bertambahnya usia sel?
Jawaban: Tidak, kami belum mencoba koreksi fibroblas dari pasien dengan berbagai usia — hanya dari dua pasien berbeda, yang memberikan hasil serupa.

Pertanyaan: Dari Delphine Larrieu: Efek luar biasa! Apakah Anda mengharapkan KO progerin lengkap pada tikus heterozigot?
Jawaban: Pada mouse satu salinan, saya tidak mengharapkan efisiensi pengeditan yang jauh berbeda dari yang kita amati saat ini, karena seharusnya sudah ada kelebihan agen pengeditan untuk setiap progerin.

Pertanyaan: Dari Andre Monteiro Da Rocha: Menurut Anda, apakah pemrograman ulang pada persentase sel yang rendah dapat memperbaiki fungsi sel induk, tetapi dapat menyebabkan kelelahan sel induk dewasa?
Jawaban: Kami tidak memiliki data apa pun yang dapat memberikan jawaban atas pertanyaan ini.

Pertanyaan: Dari Mei: Sepertinya kardiomiosit, pewarnaan yang indah!
Dari Abby Buchwalter: Apakah ekspresi Sun1 negatif yang dominan mengganggu semua kompleks LINC, termasuk yang dimediasi oleh Sun2?
Jawaban: Ya, ada bukti untuk in vitro ini bahwa semua Nesprins di NE dapat digantikan oleh DNSUN1

Pertanyaan: Dari Suet Nee Chen: bagaimana dan apa mekanisme yang AAV9-SunDn mampu berikan untuk efek jangka panjang? pada usia berapa Anda menyuntikkan AAV9-Sun1DN ke tikus mutan LMNA?
Jawaban: Kami menyuntikkan DNSUN1 AAV sehari setelah mendorong rekombinase Cre untuk menghapus laminA. Kami memiliki data bahwa DNSUN1 yang dikirim oleh AAV terus diekspresikan di kardiomiosit setahun setelah injeksi. Kami sedang melakukan eksperimen dosis / waktu / respons sekarang setelah kami kembali ke lab dan dapat membuat AAV kami sendiri dengan kuantitas yang memadai

Pertanyaan: Dari Martin Bergö, Viceordförande Kommittén för forskning: Menurut Anda, apa kontribusi relatif dari lamin A yang tidak ada versus lamin C dalam eksperimen knockout Lmna Anda?
Jawaban: Saya tidak yakin tentang ini tetapi Sun1 berinteraksi dengan LaminA dan di tikus HGPS kontribusinya harus semua LaminA (dari mana progerin diturunkan)

Pertanyaan: Dari jcampisi: Apa penyebab kematian di SUN1 KO atau hets?
Jawaban: Pertanyaan bagus kita masih belum tahu tapi saat ini mencurigai beberapa kelompok otot rangka Kita perlu analisis histo-pato yang layak dari tikus sekarat

Pertanyaan: Dari Tom Misteli: Colin: pernahkah Anda melihat perubahan jalur respons stres seluler pada hewan Lmna / Sun?
Jawaban: Kami belum mengukur gen / penanda respons stres pada tikus ini

Pertanyaan: Dari Delphine Larrieu: Apakah Anda membayangkan menargetkan hanya hati dengan DNSUN1 pada pasien HGPS?
Jawaban: Itu dimungkinkan mengingat serotipe dan penggunaan promotor khusus kardiomiosit. Eksperimen tersebut sedang berlangsung

Pertanyaan:Dari Yuexia Wang: Mengapa KO SUN1 memiliki manfaat yang lebih kecil pada mouse homozigot G609G?
Jawaban: Agaknya karena tikus homozigot lebih banyak mengekspresikan Progerin. Kami melihat efek respon dari heterozigot v homozigot dalam percobaan genetik kami

Pertanyaan:Dari Roland Foisner: Hai Colin, pembicaraan yang bagus. Apa dampak negatif dari upregulated SUN1 di HGPS. Roland
Jawaban: Mungkin peningkatan asosiasi jaringan MT dengan kompleks LINC. Peningkatan ekspresi Matahari / Nesprin dalam sel kultur mempengaruhi posisi inti dan migrasi sel

Suatu kehormatan bisa bertemu keluarga Basso dan Peraut. Terima kasih telah membagikan perjalanan Anda. Anda benar-benar dan inspirasi!

Terima kasih Sami dan keluarga Alexandra karena telah menjadi bagian dari lokakarya dan berbagi perjalanan inspiratif Anda dengan progeria!

Kemajuan yang fantastis Eiger dengan persetujuan di cakrawala.

Bisakah kita memperpanjang sesi ini hingga akhir minggu dan terus berdiskusi? (TERIMA KASIH, satu dan semua!) 

Workshop ini luar biasa. Saya ucapkan selamat kepada PRF yang telah berkomitmen untuk melakukan kegiatan yang luar biasa ini. Tanpa ragu, workshop ini memberi saya banyak pengetahuan untuk masa depan saya. Itu menakjubkan. Bersama-sama kita akan menemukan obatnya!

Selalu terkesan dengan sains yang menarik di pertemuan PRF. Banyak pujian kepada penyelenggara karena telah melestarikan pengalaman lokakarya komunitas bahkan dalam format virtual ini!

Kalian semua ROCK !!! Terima kasih atas kesempatan besar ini, memikirkan bertahun-tahun yang lalu, sekarang seperti hidup di masa depan! Senang menjadi bagian darinya

Saya merindukan gitar Dr. Collin. Kerja bagus!

Terima kasih banyak telah mengatur ini, benar-benar puncak minggu saya!

Terima kasih untuk semuanya dan sampai jumpa tahun depan di Cambridge !!

 Terima kasih telah bergabung dengan kami!