답변 : PK / PD 연구는 심장, 대동맥 및 신장에서 100 % 생체 이용률을 나타 냈습니다. 신장은 조직 학적 검사와 PK / PD 데이터에 근거하여 축적의 제안이있는 유일한 조직이었습니다. SRP-2001의 단일 용량 투여는 PPMO가 심장에서 빠르게 제거되고 (2 시간 이내) 대동맥에서 4 시간 이내에 제거되었지만 신장에서 48 시간까지 지속되었음을 보여주었습니다. 정량적 ddPCR은 지금까지 테스트 한 피부 (대동맥, 심장, 신장, 간, 대퇴사 두근, 뼈)를 제외한 모든 조직에서 G608G 비밀 스플 라이스 억제 활성을 입증했지만, 활동은 조직에 따라 다릅니다.

프랜시스, 마이크, 웨인

답변 :질문에 대해서는 솔직히이 질문에 대한 답을 모르겠습니다. 그러나 일반적인 성인에서는 판막 석회화의 정도와 Mg / Ca 섭취량을 연관시키지 않으며, 더 무거운 석회화는 다른 요인으로 인한 것일 수 있습니다.

피낙 샤 박사

답변 : 나는 Dr. Shah의 의견에 동의합니다. 아마도 HGPS에서 판막 석회화의 원인은 우리가 노인 환자에서 보는 것과 다릅니다. 나는 또한 Ca와 Mg 대사에 대한 지식이 없습니다.

Francesco Musumeci 박사

답변 : 라민 A / C 널 (LMNA^{- / -}) 마우스 모델은 심장 기능의 상실과 함께 DCM을 개발합니다. 더욱이,이 마우스는 심장 전도 및 광범위한 심장 섬유증에 결함이 있으며 5-8 주령에 조기 사망을 보입니다 (Auguste et al., 2018; Frock et al., 2012; Sullivan, 1999). 그러나 Lamin A (Fong et al., 2006) 또는 lamin C (Coffinier et al., 2010) 만없는 마우스 모델은 심장 결함을 나타내지 않고 정상적인 수명을 갖습니다.

참조 :
Auguste, G., Gurha, P., Lombardi, R., Coarfa, C., Willerson, JT, & Marian, AJ (2018). 심장에서 활성화 된 FOXO 전사 인자의 억제는 Laminopathies의 마우스 모델에서 생존을 연장합니다. https://doi.org/10.1161/CIRCRESAHA.117.312052

Coffinier, C., Jung, HJ, Li, Z., Nobumori, C., Yun, UJ, Farber, EA, Davies, BS, Weinstein, MM, Yang, SH, Lammerding, J., Farahani, JN, Bentolila, LA, Fong, LG, & Young, SG (2010). prelamin a 처리를 우회하는 lamin A의 직접 합성은 섬유 아세포에서 기형 핵을 유발하지만 생쥐에서는 병리를 감지 할 수 없습니다. 생물 화학 저널, 285(27), 20818-20826. https://doi.org/10.1074/jbc.M110.128835

Fong, LG, Bergo, MO, Young, SG, Fong, LG, Ng, JK, Lammerding, J., Vickers, TA, Meta, M., Coté, N., Gavino, B., Qiao, X., Chang , SY, Young, SR, Yang, SH, Stewart, CL, Lee, RT, Bennett, CF, Bergo, MO, & Young, SG (2006). Prelamin A와 lamin A는 핵층에 없어서는 안될 것으로 보인다. 임상 조사 저널, 116(3), 743-752. https://doi.org/10.1172/JCI27125.with

Frock, RL, Chen, SC, Da, D., Frett, E., Lau, C., Brown, C., Pak, DN, Wang, Y., Muchir, A., Worman, HJ, Santana, LF, Ladiges, WC, Rabinovitch, PS 및 Kennedy, BK (2012). 라민 A의 심근 세포 특이 적 발현은 Lmna-/-마우스에서 심장 기능을 향상시킵니다. PLoS ONE, 7(8), 1-9. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0042918

Sullivan, T. (1999). A- 타입 라민 발현의 손실은 근이영양증으로 이어지는 핵 봉투 무결성을 손상시킵니다. 세포 생물학의 전표, 147(5), 913-920. https://doi.org/10.1083/jcb.147.5.913

질문 : Tom Misteli로부터 : 동물에서 lonafarnib + tozilizumab 치료는 얼마나 걸렸습니까?
답변 : 22 주부터 30 주까지 이형 접합 동물을 대상으로 예비 실험을 수행했습니다. 이전에 토 실리 주맙으로 관찰 된 체중 증가에 대한 영향을 평가하기 위해이 시간 프레임에 초점을 맞추고 싶습니다.

질문 : Sgonzalo에서 : 아름다운 이야기 Giovanna와 Sammy !!! 토 실리 주맙 치료의 부작용을 보셨습니까? 아니면 조로증 마우스에서 개선되지 않은 표현형이 있습니까? Giovanna Lattanzi 박사에게 : 질문 : tom misteli에서 : 동물에서 lonafarnib + tozilizumab 치료가 얼마나 오래 걸렸습니까?
답변 : Susana 감사합니다. 아니요, 토 실리 주맙의 부작용은 없었습니다. 조사 된 표현형 중 (후만증, 지방 조직 이영양증, 모발 및 피부 결함, 운동 활동, 대동맥 병변 및 심근 과다 혈관 증)이 지연 / 개선되었습니다.

댓글: MARIE GERHARD-HERMAN에서 : 류마티스 질환 및 혈관염에 미국에서도 사용됨
댓글: 혈관염 사용에 대한 흥미로운 정보에 대해 Marie에게 감사드립니다.

댓글: PC stefano에서 : Tocilizumab은 면역 ​​억제 효과없이 Castleman 질병을 치료하기 위해 일본에서도 승인되었습니다.
댓글: 이러한 정보에 대해 Stefano에게 감사드립니다.

질문 : Delphine Larrieu : HGPS 세포 / HGPS 마우스 모델에서 프로 제리 닌 처리시 DNA 손상이 감소하는 것을 보십니까?
답변 : progerinin 처리 후 DNA 복구 관련 유전자 (BRCA1, Rad51 등)가 변하는 것을 관찰했습니다.

질문 : Delphine Larrieu : Werner에서 progerinin은 어떻게 작동합니까?
내가 아는 한 프로 게린을 발현하지 않는 증후군? 분자에 다른 표적이 있습니까?
답변 : WS 세포는 또한 정상 노화와 같이 소량의 프로 게린을 생성 할 수 있습니다.
세포. 우리는 mRNA 수준에서 WS 세포에서 프로 게린 발현을 관찰했습니다.
우리는 WRN 단백질이 프로 게린을 억제하는 기능을 할 수 있다고 생각합니다. 그러나
WS 환자의 경우 WRN 단백질이 없기 때문에 progerin 발현은
20 대와 30 대에 발생하는 것으로 생각됩니다.
사람들.

질문 : Bob Bishop에서 : 프로 게리 닌 결합 부위가 생화학 적으로 정의되어 있습니까?
구조적으로? 추가 화합물을 찾기위한 생화학 분석이 있습니까?
이 메커니즘으로?
답변 : 우리는 비오틴-아비딘 비드 풀다운 분석을 수행하고
perogerinin과 progerin의 특이 적 상호 작용이지만 lamin A, lamin과는 아님
B, p53 또는 emerin.
또한 Elisa 분석을 수행하여
추정되는 프로 게린 / 라민 A- 결합 억제제. Progerin 재조합 단백질은 화학 라이브러리 및 lamin A와 함께 순차적으로 배양되었습니다.
그러나 progerinin은 화학 물질에서 가장 효과적인 화학 물질이었습니다.
도서관.

질문 : John Cooke : 대단한 진전 Dr. Kim. Progerinin은
SASP 사이토 카인 분비?
답변 : 우리는 progerinin이 IL6 및 IL8의 발현을 감소시킬 수 있음을 관찰했습니다.
HGPS 세포.

질문 : Susan Michaelis : 연구자들이 프로 제리 닌을 사용할 수 있습니까?
답변 : 물론 요청하시면 이용하실 수 있습니다.

질문 : Thomas W Glover : 놓쳤을 수도 있지만
베르너 증후군의 유익한 효과를 담당하는 메커니즘?
답변 : WS 환자 유래 세포는 또한 소량의 프로 게린을 생성합니다.
노인에서 추출한 정상적인 세포와 비슷합니다. Progerinin은 또한
프로 게린 발현을 감소시켜 WS 세포에서 효과적입니다.

답변 : 질문에 감사드립니다 : 아니요, 염증 자체가 아닙니다. 부분적으로 염증과 관련이 있기 때문에이 프로젝트에서 대 식세포를 연구 한 결과 ICM 기저 및 ApoAI- 및 HDL- 자극 된 대 식세포 콜레스테롤 유출 증가. 이 효과는 때때로 생체 내 역 콜레스테롤 수송 증가와 관련이 있기 때문에 ICM 억제는 죽상 경화증 발달을 감소시킬 것입니다.

질문 : Vandres에서 : 다른 연령대의 인간 HGPS 섬유 아세포 (시험관 내)에서 DNA 보정을 시도하고 세포가 노화함에 따라 감소하는지 확인하기 위해 표현형의 정상화를 테스트 했습니까?
답변 : 아니요, 우리는 여러 연령대의 환자로부터 섬유 아세포 교정을 시도하지 않았습니다. 단지 두 명의 다른 환자로부터 만 비슷한 결과를 얻었습니다.

질문 : Delphine Larrieu : 놀라운 효과! 이형 접합 마우스에서 완전한 프로 게린 KO를 기대할 수 있습니까?
답변 : 단일 카피 마우스에서는 각 프로 게린에 대해 이미 과잉의 편집 에이전트가 있어야하기 때문에 현재 관찰되는 것과는 다른 편집 효율성을 기대할 수 없습니다.

질문 : Andre Monteiro Da Rocha : 낮은 비율의 세포를 재 프로그래밍하면 줄기 세포 기능을 복구 할 수 있지만 성체 줄기 세포 고갈로 이어질 수 있다고 생각하십니까?
답변 : 이 질문에 대한 답을 알 수있는 데이터가 없습니다.

질문 : 메이에서 : 심근 세포, 아름다운 염색처럼 보입니다!
Abby Buchwalter에서 : 우세한 음성 Sun1 발현이 Sun2가 매개하는 것을 포함하여 모든 LINC 복합체를 방해합니까?
답변 : 네, NE의 모든 Nesprins가 DNSUN1에 의해 대체 될 수 있다는 점에서 시험 관내에 대한 증거가 있습니다.

질문 : Suet Nee Chen : AAV9-SunDn이 장기적인 영향을 미칠 수있는 메커니즘은 어떻게 그리고 무엇입니까? LMNA 돌연변이 마우스에 AAV9-Sun1DN을 몇 살에 주입 했습니까?
답변 : 우리는 laminA를 삭제하기 위해 Cre 재조합 효소를 유도 한 후 하루에 DNSUN1 AAV를 주입했습니다. AAV에 의해 전달 된 DNSUN1이 주사 후 XNUMX 년 동안 심근 세포에서 계속 발현된다는 데이터가 있습니다. 이제 실험실로 돌아와 충분한 양으로 자체 AAV를 만들 수 있으므로 용량 / 타이밍 / 반응 실험을 수행하고 있습니다.

질문 : Martin Bergö, Viceordförande Kommittén för forskning : Lmna 녹아웃 실험에서 라민 A와 라민 C가없는 상대적 기여는 무엇이라고 생각하십니까?
답변 : 나는 이것에 대해 확실하지 않지만 Sun1은 LaminA와 상호 작용하며 HGPS 마우스에서 기여는 모든 LaminA (프로 게린이 파생 됨)이어야합니다.

질문 : jcampisi에서 : SUN1 KO 또는 hets의 사망 원인은 무엇입니까?
답변 : 아직 잘 모르겠지만 현재 일부 골격근 그룹이 의심되는 좋은 질문입니다. 죽어가는 생쥐에 대한 적절한 조직 병리 분석이 필요합니다.

질문 : Tom Misteli에서 : Colin : Lmna / Sun 동물에서 세포 스트레스 반응 경로의 변화를 보셨습니까?
답변 : 우리는 아직이 마우스에서 스트레스 반응 유전자 / 마커를 측정하지 않았습니다.

질문 : Delphine Larrieu에서 : HGPS 환자에서 DNSUN1으로 심장만을 표적으로 삼는 것을 상상할 수 있습니까?
답변 : 이는 혈청 형과 심근 세포 특이 적 프로모터의 사용을 고려할 때 가능합니다. 해당 실험은 현재 진행 중입니다.

질문 :Yuexia Wang : 왜 KO SUN1이 동형 접합 G609G 마우스에 대한 이점이 적습니까?
답변 : 아마도 동형 접합 마우스가 더 많은 프로 게린을 발현하기 때문일 것입니다. 유전 실험에서 이형 접합체 v 동형 접합체의 반응 효과를 확인합니다.

질문 :Roland Foisner : 안녕하세요 Colin, 좋은 이야기입니다. HGPS에서 상향 조절 된 SUN1의 부정적인 영향은 무엇입니까? 롤랑
답변 : 아마도 MT 네트워크와 LINC 단지의 연관성이 증가했을 것입니다. 배양 세포에서 증가 된 Sun / Nesprin 발현은 핵 위치 및 세포 이동에 영향을줍니다.

바소와 페 라우트 가족을 만나게되어 영광입니다. 여행을 공유해 주셔서 감사합니다. 당신은 진정으로 영감을 받았습니다!

워크숍에 참여하고 progeria와 함께 영감을주는 여정을 공유해 주신 Sami와 Alexandra의 가족에게 감사드립니다!

수평선에 승인과 함께 환상적인 진행 아이거.

이 세션을 주말까지 연장하고 토론을 계속할 수 있습니까? (모두 감사합니다!) 

이 워크숍은 대단했습니다. 저는이 위대한 활동을하겠다는 약속을 한 PRF를 축하합니다. 의심 할 여지없이이 워크숍은 제 미래에 대한 많은 지식으로 저를 채웠습니다. 그것은 훌륭했다. 함께 우리는 치료법을 찾을 것입니다!

PRF 회의에서 항상 흥미로운 과학에 깊은 인상을 받았습니다. 이 가상 형식에서도 커뮤니티 워크숍 경험을 보존하기 위해 주최자에게 많은 찬사를 보냅니다!

당신은 모두 ROCK !!! 이 좋은 기회를 주셔서 감사합니다. 몇 년 전을 생각하고 지금은 미래에 사는 것 같습니다! 그것의 일부가되어 행복

콜린 박사의 기타가 그립습니다. 잘 했어!

이번 주 하이라이트를 정리 해주셔서 감사합니다!

감사합니다. 내년 캠브리지에서 만나요 !!

 참여 해주셔서 감사합니다!