答： PK / PD研究表明，心脏，主动脉和肾脏具有100％的生物利用度。 根据组织学检查和PK / PD数据，肾脏是唯一有积累迹象的组织。 SRP-2001的单剂量给药证明PPMO可在2小时内从心脏快速清除，在4小时内从主动脉清除，但在肾脏中持续至48小时。 定量ddPCR显示，到目前为止，除皮肤测试（主动脉，心脏，肾脏，肝脏，股四头肌，骨骼）外，所有组织中的G608G隐含剪接抑制活性均有效，但活性随组织而异。

弗朗西斯，麦克和韦恩

答：关于这个问题，老实说，我不知道这个问题的答案。 然而，在典型的成年人中，我们不将瓣膜钙化程度与Mg / Ca摄入量相关联，钙化较重可能是由于其他因素引起的。

Pinak Shah博士

答： 我同意沙阿博士的观点。 HGPS中瓣膜钙化的原因可能与我们在老年患者中发现的原因不同。 我也没有关于钙和镁代谢的知识。

Francesco Musumeci博士

答： 薄层空调的空值（姆纳 ^{- / -} ）小鼠模型发展为DCM并伴有心脏功能丧失。 此外，这些小鼠在心脏传导和广泛的心脏纤维化方面表现出缺陷，并在5-8周龄时过早死亡（Auguste等，2018; Frock等，2012; Sullivan，1999）。 但是，仅缺乏Lamin A（Fong等，2006）或Lamin C（Coffinier等，2010）的小鼠模型没有显示出心脏缺陷，并且寿命正常。

参考文献：
奥古斯特（Auguste），古哈（Gurha），隆巴迪（Lombardi），库尔法（Coarfa），威尔逊（J.） 心脏中激活的FOXO转录因子的抑制延长了Laminopathies小鼠模型的存活。. https://doi.org/10.1161/CIRCRESAHA.117.312052

Coffinier，C.，Jung，HJ，Li，Z.，Nobumori，C.，Yun，UJ，Farber，EA，Davies，BS，Weinstein，MM，Yang，SH，Lammerding，J.，Farahani，JN，Bentolila， LA，Fong，LG和Young，SG（2010）。 绕过prelamin的加工过程直接合成lamin A，在成纤维细胞中引起核畸形，但在小鼠中未发现可检测的病理。 生物化学学报, 285（27），20818-20826。 https://doi.org/10.1074/jbc.M110.128835

Fong，LG，Bergo，MO，Young，SG，Fong，LG，Ng，JK，Lammerding，J.，Vickers，TA，Meta，M.，Coté，N.，Gavino，B.，Qiao，X.，Chang ，SY，Young，SR，Yang，SH，Stewart，CL，Lee，RT，Bennett，CF，Bergo，MO和Young，SG（2006）。 Prelamin A和lamin A在核层中似乎是可有可无的。 该临床研究杂志, 116（3），743-752。 https://doi.org/10.1172/JCI27125.with

Frock，RL，Chen，SC，Da，D.，Frett，E.，Lau，C.，Brown，C.，Pak，DN，Wang，Y.，Muchir，A.，Worman，HJ，Santana，LF， Ladiges，WC，Rabinovitch，PS和Kennedy，BK（2012）。 核纤层蛋白A的心肌细胞特异性表达改善了Lmna-/-小鼠的心脏功能。 PLoS ONE的, 7（8），1-9。 https://doi.org/10.1371/journal.pone.0042918

Sullivan，T。（1999）。 A型核纤层蛋白表达的丧失会损害核膜的完整性，从而导致肌肉营养不良。 细胞生物学杂志, 147（5），913-920。 https://doi.org/10.1083/jcb.147.5.913

问题： 来自汤姆·米斯泰利（Tom Misteli）：lonafarnib + tozilizumab在动物中治疗了多长时间？
答： 我们在第22周到第30周之间对杂合动物进行了初步实验。我们希望专注于这个时间范围，以评估先前使用tocilizumab观察到的对体重增加的影响。

问题： 来自Sgonzalo：美丽的故事Giovanna和Sammy！ 您看到托珠单抗治疗有任何副作用吗？ 还是在早衰小鼠中没有改善的表型？ 致Giovanna Lattanzi博士：问题：tom misteli：lonafarnib + tozilizumab治疗动物多长时间了？
答： 谢谢苏珊娜。 不，我们没有看到托珠单抗有任何副作用。 在检查的表型（驼背，脂肪组织营养不良，头发和皮肤缺陷，运动能力，主动脉病变和心肌肥厚）中，延迟/改善了。

评论： 来自MARIE GERHARD-HERMAN：在美国也用于风湿病和血管炎
回复： 感谢Marie提供有关使用脉管炎的有趣信息。

评论： 来自pc stefano：Tocilizumab在日本也被批准用于治疗无免疫抑制作用的Castleman病
回复： 感谢Stefano提供这些信息。

问题： 来自Delphine Larrieu：在HGPS细胞/ HGPS小鼠模型中，用早老素治疗后，您是否发现DNA损伤减少了？
答： 我们观察到，用早老蛋白处理后，DNA修复相关基因（BRCA1，Rad51等）发生了改变。

问题： 来自Delphine Larrieu：早老素如何在Werner中起作用
据我所知，不表达早老素的综合症？ 该分子还有其他靶标吗？
答： WS细胞也可以像正常衰老一样产生少量的早老素
细胞。 我们在mRNA水平观察了WS细胞中progerin的表达。
我们认为WRN蛋白可以起到抑制早老蛋白的作用。 但是，在
WS患者，由于没有WRN蛋白，因此progerin表达为
被认为发生在20年代和30年代，与正常年龄的人一样多
人。

问题： 来自鲍勃·毕晓普（Bob Bishop）：早春素结合位点是通过生物化学方法确定的还是
在结构上？ 是否进行生化分析以找到其他化合物
用这种机制？
答： 我们进行了生物素-抗生物素蛋白珠的下拉测定，并观察了
Perogerinin与progerin的特异性相互作用，但与Lamin A，lamin无关
B，p53或Emerin。
我们还进行了Elisa分析，以发现其他可能
是推定的早老蛋白/ lamin A结合抑制剂。 将Progerin重组蛋白与化学文库和层粘连蛋白A相继孵育。
但是，早老素是该化学品中最有效的化学品
图书馆。

问题： 来自约翰·库克（John Cooke）：金博士的进步很大。 Progerinin会减少
SASP细胞因子的分泌？
答： 我们观察到progerinin可以降低IL6和IL8的表达。
HGPS单元。

问题： 来自Susan Michaelis：研究人员可以使用早老素吗？
答： 当然，如果您要求，它也可以使用。

问题： 来自Thomas W Glover：我可能已经错过了，但是您认为
沃纳综合征的有益作用的机制？
答： WS患者衍生的细胞也会产生少量的早老素，因为
与正常人的细胞一样。 早老素也可以
通过减少progerin表达在WS细胞中有效。

答： 感谢您提出的问题：不，不是炎症本身。 部分与炎症有关，我们在这个项目中研究了巨噬细胞，发现敲除 ICMT 基础，ApoAI和HDL刺激的巨噬细胞胆固醇外排增加。 由于这种作用有时与体内体内胆固醇反向转运增加有关，因此我们想确定是否 ICMT 抑制会减少动脉粥样硬化的发展。

问题： 来自vandres：您是否尝试过在不同年龄的人类HGPS成纤维细胞中进行DNA校正（体外），并测试了它们的表型是否正常，以查看其是否随着细胞的衰老而减少？
答： 不，我们尚未尝试矫正来自不同年龄段患者的成纤维细胞，仅针对来自两名不同患者的成纤维细胞，其结果相似。

问题： 来自Delphine Larrieu：惊人的效果！ 您是否希望杂合小鼠具有完整的早老素KO？
答： 在单拷贝鼠标中，我不一定会期望与我们目前观察到的编辑效率大不相同，因为每种早老蛋白应该已经有过量的编辑剂。

问题： 来自安德烈·蒙特罗·达罗沙（Andre Monteiro Da Rocha）：您认为低百分比的细胞重编程可以修复干细胞功能，但可能导致成年干细胞衰竭吗？
答： 我们没有任何数据可以告知您该问题的答案。

问题： 来自梅：看起来像心肌细胞，美丽的染色！
来自Abby Buchwalter：主要的负Sun1表达是否会破坏所有LINC复合物，包括由Sun2介导的复合物？
答： 是的，有这种体外试验的证据，即DNSUN1可以取代NE中的所有Nesprins

问题： 来自Suet Nee Chen：AAV9-SunDn能够产生长期影响的机制是什么？ 您在几岁时向LMNA突变小鼠注射了AAV9-Sun1DN？
答： 在诱导Cre重组酶删除laminA之后的一天，我们注射了DNSUN1 AAV。 我们有数据表明，注射后一年，AAV传递的DNSUN1继续在心肌细胞中表达。 现在我们回到了实验室，可以进行足够数量的自己的AAV，因此我们正在进行剂量/定时/响应实验

问题： 来自MartinBergö，总检察长弗格福德（FordordförandeKommittén）提出的建议：您认为在Lmna基因敲除实验中缺少Lamin A与Lamin C的相对贡献是什么？
答： 我不确定这一点，但Sun1与LaminA相互作用，并且在HGPS小鼠中，其贡献必须全部为LaminA（源自早衰素）

问题： 来自jcampisi：SUN1 KO或hets的死因是什么？
答： 我们仍然不知道这个好问题，但目前怀疑是骨骼肌群。我们需要对垂死的小鼠进行体面的组织病理学分析

问题： 来自汤姆·米斯泰利（Tom Misteli）：科林（Colin）：您是否看到过Lmna / Sun动物的细胞应激反应途径发生了变化？
答： 我们尚未在这些小鼠中测量任何应激反应基因/标记

问题：来自Delphine Larrieu：您是否打算在HGPS患者中使用DNSUN1仅针对心脏？
答： 考虑到心肌细胞特异性启动子的血清型和用途，这是可能的。 这些实验目前正在进行中

问题：来自王越霞：为什么KO SUN1对纯合G609G小鼠的益处较小？
答： 大概是因为纯合子小鼠表达更多的Progerin。 我们在基因实验中看到杂合子v纯合子的反应效果

问题：来自罗兰·福伊斯纳（Roland Foisner）：嗨，科林，很好的演讲。 HGPS中SUN1上调的负面影响是什么？ 罗兰
答： MT网络与LINC复杂性的关联可能增加。 培养细胞中增加的Sun / Nesprin表达会影响核定位和细胞迁移

很荣幸认识Basso和Peraut一家。 感谢您分享您的旅程。 您是真正的灵感！

感谢萨米（Sami）和亚历山德拉（Alexandra）的家人参加研讨会，并与早衰症患者分享您的鼓舞之旅！

惊人的进展艾格峰得到了认可。

我们可以将本次会议延长到本周末结束，并继续进行讨论吗？ （谢谢，一劳永逸！） 

这个研讨会真是不可思议。 我祝贺PRF致力于开展这项伟大的活动。 毫无疑问，这次研讨会为我的未来增添了很多知识。 这是惊人的。 我们在一起将找到治愈的方法！

在PRF会议上始终对令人兴奋的科学印象深刻。 对于组织者来说，即使以这种虚拟格式保存社区研讨会的经验也要多多赞扬！

你们都摇滚！！！ 感谢您有这么多的机会，想想很多年前，现在就像生活在未来中！ 很高兴成为其中的一员

我想念科林博士的吉他。 做得好！

非常感谢您组织这次活动，这确实是我这一周的亮点！

谢谢大家，明年在剑桥见面！！

 谢谢大家加入我们！