תשובה: מחקרי PK / PD הצביעו על זמינות ביולוגית של 100% בלב, באבי העורקים ובכליות. הכליה הייתה הרקמה היחידה בה הייתה הצעה להצטברות, על סמך בדיקה היסטולוגית ונתוני PK / PD. מתן מינון יחיד של SRP-2001 הוכיח כי PPMO נוקה במהירות מהלב (תוך שעתיים), נוקה מאבי העורקים תוך 2 שעות, אך נמשך בכליה עד לנקודת הזמן של 4 שעות. DdPCR כמותי הדגים פעילות עיכוב אחיזת G48G בכל הרקמות למעט עור שנבדקו עד כה (אבי העורקים, לב, כליה, כבד, ארבע ראשי, עצם), אם כי הפעילות השתנתה בהתאם לרקמה.

פרנסיס, מייק ווין

תשובה:לגבי השאלה, למען האמת, אני לא יודע את התשובה לשאלה זו. אצל מבוגר טיפוסי, לעומת זאת, איננו מתואמים את מידת הסתיידות המסתם עם צריכת Mg / Ca, ההסתיידות הכבדה ככל הנראה נובעת מגורמים אחרים.

ד"ר פינאק שאה

תשובה: אני מסכים עם דעתו של ד"ר שאה. ככל הנראה הסיבות להסתיידות המסתם ב- HGPS שונות מזו שאנו רואים בחולים קשישים. אין לי שום ידע על מטבוליזם Ca ו- Mg.

ד"ר פרנצ'סקו מוסומצ'י

תשובה: למינציה A / C null (למנא^{- / -}מודל העכבר מפתח DCM מלווה באובדן תפקוד לב. יתר על כן, עכברים אלה מגלים פגמים בהולכה לבבית ופיברוזיס לב נרחב, ובמוות מוקדם בגיל 5-8 שבועות (Auguste et al., 2018; Frock et al., 2012; Sullivan, 1999). עם זאת, דגמי עכברים החסרים רק Lamin A (Fong et al., 2006) או lamin C (Coffinier et al., 2010) אינם מראים פגמים בלב ובעלי אורך חיים תקין.

הפניות:
Auguste, G., Gurha, P., Lombardi, R., Coarfa, C., Willerson, JT, & Marian, AJ (2018). דיכוי גורמי תעתוק FOXO שהופעלו בלב ממשיך בהישרדות במודל עכבר של למינופתיה.. https://doi.org/10.1161/CIRCRESAHA.117.312052

Coffinier, C., Jung, HJ, Li, Z., Nobumori, C., Yun, UJ, Farber, EA, Davies, BS, Weinstein, MM, Yang, SH, Lammerding, J., Farahani, JN, Bentolila, LA, Fong, LG, & Young, SG (2010). סינתזה ישירה של למין A, העוקפת עיבוד של פרלמין, גורמת לגרעינים מעוותים בפיברובלסטים אך ללא פתולוגיה הניתנת לזיהוי בעכברים. כתב עת לכימיה ביולוגית, 285(27), 20818-20826. https://doi.org/10.1074/jbc.M110.128835

פונג, LG, Bergo, MO, Young, SG, Fong, LG, Ng, JK, Lammerding, J., Vickers, TA, Meta, M., Coté, N., Gavino, B., Qiao, X., Chang , SY, Young, SR, Yang, SH, Stewart, CL, Lee, RT, Bennett, CF, Bergo, MO, & Young, SG (2006). פרלמין A ולמין A נראים ניתנים לפרישה בלמינה הגרעינית. כתב העת לחקירה קלינית, 116(3), 743-752. https://doi.org/10.1172/JCI27125.with

Frock, RL, Chen, SC, Da, D., Frett, E., Lau, C., Brown, C., Pak, DN, Wang, Y., Muchir, A., Worman, HJ, Santana, LF, Ladiges, WC, Rabinovitch, PS, and Kennedy, BK (2012). ביטוי ספציפי לקרדיומיוציטים של למין A משפר את תפקוד הלב בעכברי Lmna - / -. PLoS ONE, 7(8), 1-9. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0042918

סאליבן, ט '(1999). אובדן ביטוי למיני מסוג A פוגע בשלמות המעטפת הגרעינית המוביל לניוון שרירים. כתב העת לביולוגיה של התא, 147(5), 913-920. https://doi.org/10.1083/jcb.147.5.913

שאלה: מאת טום מיסטלי: כמה זמן היה הטיפול ב- lonafarnib + tozilizumab בבעלי חיים?
תשובה: ביצענו ניסוי ראשוני בבעלי חיים הטרוזיגוטים החל משבוע 22 עד שבוע 30. אנו רוצים להתמקד במסגרת זמן זו כדי להעריך את ההשפעה על עלייה במשקל שנצפתה בעבר עם tocilizumab.

שאלה: מסגונסאלו: סיפור יפה ג'ובאנה וסמי !!! האם ראית תופעות לוואי כלשהן של טיפול ב- tocilizumab? או פנוטיפים שלא שופרו בעכברי פרוגריה? לד"ר ג'ובאנה לטננצי: שאלה: מטום מיסטלי: כמה זמן היה הטיפול ב- lonafarnib + tozilizumab בבעלי חיים?
תשובה: תודה סוזנה. לא, לא ראינו שום תופעת לוואי של tocilizumab. בין הפנוטיפים שנבדקו (קיפוזיס, ניוון רקמות השומן, מומים בשיער ובעור, פעילות תנועתית, נגעי אבי העורקים והיפרטרופיה של שריר הלב) עוכבו / השתפרו.

תגובה: מאת MARIE GERHARD-HERMAN: משמש גם בארה"ב למחלות ראומטולוגיות ולדלקת כלי הדם
תגובה: תודה לך מארי על המידע המעניין הזה על השימוש בדלקת כלי הדם.

תגובה: ממחשב סטפנו: Tocilizumab מאושר גם ביפן לטיפול במחלת קסטלמן ללא השפעות חיסוניות.
תגובה: תודה לך סטפנו על המידע הזה.

שאלה: מדלפין לאריו: האם אתה רואה ירידה בנזק ל- DNA לאחר טיפול בפרוגרינין בתאי HGPS / דגמי עכבר HGPS?
תשובה: ראינו כי גנים הקשורים לתיקון DNA (BRCA1, Rad51 וכו ') שונו לאחר הטיפול בפרוגרינין.

שאלה: מאת דלפין לאריו: איך פרוגרינין עובד אצל ורנר
תסמונת ש - ככל הידוע לי - אינה מבטאת פרוגרין? האם למולקולה יש יעדים אחרים?
תשובה: תאי WS יכולים גם לייצר כמות קטנה של פרוגרין כמו בגיל רגיל
תאים. ראינו ביטוי של פרוגרין בתאי WS ברמות ה- mRNA.
אנו חושבים שחלבון WRN יכול לתפקד כדי לעכב פרוגרין. עם זאת, ב
במקרה של חולי WS, מכיוון שאין חלבון WRN, ביטוי לפרוגרין הוא
מחשבה להתרחש בשנות העשרים והשלושים, ככל שזה נראה בגילאים רגילים
אנשים.

שאלה: מאת בוב בישופ: האם אתר הקישור לפרוגרינין מוגדר ביוכימית או
מבנית? האם יש בדיקה ביוכימית למציאת תרכובות נוספות
עם המנגנון הזה?
תשובה: ביצענו בדיקה נפתחת של חרוז ביוטין-אבידין וצפינו ב
אינטראקציה ספציפית של פרוגרינין עם פרוגרין אך לא עם למין A, למין
B, p53, או emerin.
ביצענו גם את מבחני אליסה כדי למצוא תרכובות נוספות שיכולות
להיות מעכבי פרוגרין / למין A מחייבים. חלבון רקומביננטי של פרוגרין הודגר ברצף עם ספרייה כימית ולמין A.
עם זאת, פרוגרינין היה הכימי היעיל ביותר בחומר הכימי
סִפְרִיָה.

שאלה: מאת ג'ון קוק: התקדמות גדולה ד"ר קים. האם פרוג'רינין מפחית את
הפרשת ציטוקינים של SASP?
תשובה: ראינו כי פרוגרינין יכול להפחית את הביטוי של IL6 ו- IL8 ב-
תאי HGPS.

שאלה: מאת סוזן מיכאליס: האם פרוגרינין זמין לחוקרים?
תשובה: כמובן, זה זמין אם אתה מבקש.

שאלה: מאת תומאס וו גלובר: אולי פספסתי את זה אבל מה לדעתך הוא
מנגנון האחראי על ההשפעות המיטיבות בתסמונת ורנר?
תשובה: תאים שמקורם בחולי WS מייצרים גם כמות קטנה של פרוגרין, כמו
כמו תאים נורמליים שמקורם באנשים בגילאים. פרוגרינין יכול להיות גם
יעיל בתאי WS על ידי הפחתת ביטוי לפרוגרין.

תשובה: תודה על השאלה: לא, לא דלקת כשלעצמה. הקשורים חלקית לדלקת, למדנו מקרופאגים בפרויקט זה ומצאנו כי נוקאאוט של Icmt ב מגביר את זרם הכולסטרול מקרופאג, הן בסיסי והן מגורה באפוי-איי ו- HDL. מכיוון שהשפעה זו קשורה לעיתים בהובלה מוגברת של כולסטרול הפוך in vivo, ברצוננו לקבוע אם Icmt עיכוב יפחית את התפתחות טרשת העורקים.

שאלה: מוונדרס: האם ניסית תיקון דנ"א בפיברובלסטים אנושיים של HGPS בגילאים שונים (במבחנה) ובדקת את הנורמליזציה של הפנוטיפ שלהם כדי לראות אם הוא פוחת ככל שהתאים מזדקנים?
תשובה: לא, לא ניסינו תיקון בפיברובלסטים מחולים בגילאים שונים - רק משני מטופלים שונים, שהניבו תוצאות דומות.

שאלה: מאת דלפין לאריו: אפקטים מדהימים! האם היית מצפה ל- KO פרוג'רין מוחלט בעכברים הטרוזיגוטיים?
תשובה: בעכבר העותק הבודד לא הייתי מצפה בהכרח ליעילות עריכה שונה בהרבה ממה שאנחנו צופים כרגע, מכיוון שכבר צריך להיות עודף של סוכן עריכה לכל פרוג'רין.

שאלה: מאת אנדרה מונטיירו דה רושה: האם אתה חושב שתכנות מחדש של אחוז נמוך של תאים יכול לתקן את תפקוד תאי הגזע, אך עשוי להוביל למיצוי תאי גזע של מבוגרים?
תשובה: אין לנו נתונים שיכולים להודיע ​​על תשובה לשאלה זו.

שאלה: מאת מיי: נראה כמו קרדיומיוציט, מכתים יפה!
מאת אבי בוקוולטר: האם ביטוי שלילי Sun1 דומיננטי משבש את כל מתחמי LINC, כולל המתווכים על ידי Sun2?
תשובה: כן ישנן עדויות לכך במבחנה בכך שניתן להעביר את כל Nesprins ב- NE על ידי DNSUN1

שאלה: מאת Suet Nee Chen: כיצד ומה המנגנון שמסוגל AAV9-SunDn להשפיע לטווח הארוך? באיזה גיל הזרקת את AAV9-Sun1DN לעכברים המוטנטים LMNA?
תשובה: הזרקנו את ה- AAV של DNSUN1 יום לאחר שגרמנו את ה- Cre recombinase למחוק את laminA. יש לנו נתונים ש- DNSUN1 שנמסר על ידי AAV ממשיך לבוא לידי ביטוי בקרדיומיוציטים שנה לאחר ההזרקה. אנו מבצעים ניסויים במינון / תזמון / תגובה כעת לאחר שחזרנו למעבדה ויכולים ליצור AAV משלנו בכמות מספקת

שאלה: מאת מרטין ברגו, סמנכ"ל הקומפטן עבור מחקר: מהי לדעתכם התרומה היחסית של למין A נעדר לעומת למין C בניסויי הנוקאאוט שלכם ב- Lmna?
תשובה: אני לא בטוח לגבי זה אבל Sun1 מתקשר עם LaminA ובעכברי HGPS התרומה חייבת להיות כולה LaminA (שממנה נגזר פרוגרין)

שאלה: מאת jcampisi: מהי סיבת המוות ב- SUN1 KO או ב- hets?
תשובה: שאלה טובה אנחנו עדיין לא יודעים אבל כרגע חושדים בקבוצת שרירי שלד כלשהי. אנחנו זקוקים לניתוח היסטו-פאתו הגון של העכברים הגוססים

שאלה: מאת טום מיסטלי: קולין: האם ראית שינויים במסלולי תגובת הלחץ הסלולרית בחיות למנה / שמש?
תשובה: עדיין לא מדדנו שום גנים / סמני תגובת לחץ בעכברים אלה

שאלה: מאת דלפין לאריו: האם אתה מתכוון למקד רק את הלב עם ה- DNSUN1 בחולי HGPS?
תשובה: זה אפשרי בהתחשב בסרוטייפ ובשימוש במקדם ספציפי לקרדיומיוציטים. ניסויים אלה נמצאים כעת בעיצומם

שאלה:מאת Yuexia Wang: מדוע ל- KO SUN1 יש פחות תועלת על עכברי G609G הומוזיגוטיים?
תשובה: ככל הנראה בגלל שעכברי ההומוזיגוז מבטאים יותר פרוג'רין. אנו רואים אפקט תגובה של הטרוזיגוטים נגד הומוזיגוטים בניסויים הגנטיים שלנו

שאלה:מאת רולנד פויסנר: היי קולין, שיחה נחמדה. מה ההשפעה השלילית של SUN1 מווסת ב- HGPS. רולנד
תשובה: כנראה שיוך מוגבר של רשת MT למתחם LINC. ביטוי מוגבר של השמש / נספרין בתאי תרבויות משפיע על מיקום גרעיני ונדידת תאים

כבוד להכיר את משפחת בסו ופרוט. תודה ששיתפת את המסע שלך. אתה באמת והשראה!

תודה למשפחתו של סמי ואלכסנדרה שהייתם חלק מהסדנה ושיתפתם את המסע ההשראה שלכם עם פרוגריה!

התקדמות נהדרת אייגר עם אישור באופק.

האם נוכל להאריך את הפגישה לסוף השבוע ולהמשיך בדיון? (תודה, כל אחד!) 

הסדנה הזו הייתה מדהימה. אני מברך את PRF על המחויבות לעשות את הפעילות הנהדרת הזו. ללא ספק, הסדנה הזו מילאה אותי בידע רב לעתיד. זה היה מדהים. ביחד נמצא את התרופה!

תמיד מתרשם מהמדע המרגש בישיבות PRF. כל הכבוד למארגנים לשמירת חוויית הסדנה הקהילתית גם במתכונת הוירטואלית הזו!

כולכם ROCK !!! תודה על ההזדמנות הנהדרת הזו, במחשבה לפני שנים רבות, עכשיו זה כמו לחיות בעתיד! שמח להיות חלק מזה

אני מתגעגע לגיטרה של ד"ר קולין. עבודה טובה!

תודה רבה שארגנתם את זה, באמת גולת הכותרת של השבוע שלי!

תודה לכולם ונתראה באופן אישי בשנה הבאה בקיימברידג '!!

 תודה לכולכם שהצטרפתם אלינו!