الجواب: أشارت دراسات PK / PD إلى توافر حيوي بنسبة 100٪ في القلب والشريان الأورطي والكلى. كانت الكلى هي النسيج الوحيد الذي كان هناك اقتراح بالتراكم فيه ، بناءً على الفحص النسيجي وبيانات PK / PD. أظهر إعطاء جرعة واحدة من SRP-2001 أن PPMO تم تطهيره بسرعة من القلب (في غضون ساعتين) ، وتم تطهيره من الشريان الأورطي في غضون 2 ساعات ، ولكنه استمر في الكلى حتى النقطة الزمنية 4 ساعة. أظهر ddPCR الكمي نشاط تثبيط لصق خفي لـ G48G في جميع الأنسجة باستثناء الجلد الذي تم اختباره حتى الآن (الشريان الأورطي والقلب والكلى والكبد وعضلات الفخذ والعظام) ، على الرغم من تنوع النشاط اعتمادًا على الأنسجة.

فرانسيس ومايك وواين

الجواب:فيما يتعلق بالسؤال ، بصراحة ، لا أعرف إجابة هذا السؤال. ومع ذلك ، في البالغين العاديين ، لا نربط درجة تكلس الصمامات مع تناول Mg / Ca ، فمن المحتمل أن يكون التكلس الأثقل بسبب عوامل أخرى.

الدكتور بيناك شاه

الجواب: أنا أتفق مع رأي الدكتور شاه. من المحتمل أن تكون أسباب تكلس الصمامات في HGPS مختلفة عن تلك التي نراها في المرضى المسنين. أنا أيضًا ليس لدي أي معرفة بعملية التمثيل الغذائي للكالسيوم والمغنيسيوم.

دكتور فرانشيسكو موسوميسي

الجواب: The lamin A / C فارغ (LMNA^{- / -}) نموذج الماوس يطور DCM مصحوبًا بفقدان وظيفة القلب. علاوة على ذلك ، تظهر هذه الفئران عيوبًا في التوصيل القلبي وتليف قلبي واسع النطاق وموت مبكر في عمر 5-8 أسابيع (Auguste et al. ، 2018 ؛ Frock et al. ، 2012 ؛ Sullivan ، 1999). ومع ذلك ، فإن نماذج الفئران التي تفتقر إلى Lamin A فقط (Fong et al. ، 2006) أو lamin C (Coffinier et al. ، 2010) لا تظهر عيوبًا في القلب ولها عمر افتراضي.

المراجع:
Auguste، G.، Gurha، P.، Lombardi، R.، Coarfa، C.، Willerson، JT، & Marian، AJ (2018). قمع عوامل النسخ النشط لـ FOXO في القلب يطيل البقاء في نموذج فأر لاعتلال الصفيحات. https://doi.org/10.1161/CIRCRESAHA.117.312052

Coffinier، C.، Jung، HJ، Li، Z.، Nobumori، C.، Yun، UJ، Farber، EA، Davies، BS، Weinstein، MM، Yang، SH، Lammerding، J.، Farahani، JN، Bentolila، LA ، Fong ، LG ، & Young ، SG (2010). يؤدي التوليف المباشر للامين أ ، الذي يتجاوز المعالجة الأولية ، إلى تشوه النوى في الخلايا الليفية ولكن لا يمكن اكتشاف أمراض في الفئران. مجلة الكيمياء البيولوجية, 285(شنومكس)، شنومكس-شنومكس. https://doi.org/10.1074/jbc.M110.128835

Fong و LG و Bergo و MO و Young و SG و Fong و LG و Ng و JK و Lammerding و J. و Vickers و TA و Meta و M. و Coté و N. و Gavino و B. و Qiao و X. و Chang ، SY ، Young ، SR ، Yang ، SH ، Stewart ، CL ، Lee ، RT ، Bennett ، CF ، Bergo ، MO ، & Young ، SG (2006). يبدو أن Prelamin A و lamin A يمكن الاستغناء عنها في الصفيحة النووية. مجلة التحقيقات السريرية, 116(شنومكس)، شنومكس-شنومكس. https://doi.org/10.1172/JCI27125.with

Frock، RL، Chen، SC، Da، D.، Frett، E.، Lau، C.، Brown، C.، Pak، DN، Wang، Y.، Muchir، A.، Worman، HJ، Santana، LF، Ladiges ، WC ، Rabinovitch ، PS ، & Kennedy ، BK (2012). يحسن التعبير الخاص بخلايا عضلة القلب عن lamin A وظيفة القلب في Lmna - / - الفئران. بلوس ONE, 7(شنومكس)، شنومكس-شنومكس. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0042918

سوليفان ، ت. (1999). يؤثر فقدان التعبير الصفيحي من النوع A على سلامة الغلاف النووي مما يؤدي إلى ضمور العضلات. مجلة بيولوجيا الخلية, 147(شنومكس)، شنومكس-شنومكس. https://doi.org/10.1083/jcb.147.5.913

السؤال: من Tom Misteli: ما هي مدة علاج lonafarnib + tozilizumab في الحيوانات؟
الجواب: أجرينا تجربة أولية على الحيوانات غير المتجانسة بدءًا من الأسبوع 22 حتى الأسبوع 30. نود التركيز على هذا الإطار الزمني لتقييم التأثير على زيادة الوزن الذي لوحظ سابقًا باستخدام التوسيليزوماب.

السؤال: من Sgonzalo: قصة جميلة جيوفانا وسامي !!! هل رأيت أي آثار جانبية لعلاج التوسيليزوماب؟ أو أي أنماط ظاهرية لم تتحسن في فئران الشيخوخة؟ إلى د.
الجواب: شكرا لك سوزانا. لا ، لم نر أي آثار جانبية لتوسيليزوماب. من بين الأنماط الظاهرية التي تم فحصها (الحداب ، ضمور الأنسجة الدهنية ، عيوب الشعر والجلد ، النشاط الحركي ، آفات الشريان الأورطي وتضخم عضلة القلب) تأخرت / تحسنت.

التعليق: من ماري جيرارد هيرمان: يستخدم أيضًا في الولايات المتحدة لأمراض الروماتيزم والتهاب الأوعية الدموية
الرد: شكرا ماري على هذه المعلومات الشيقة حول استخدام التهاب الأوعية الدموية.

التعليق: من pc stefano: تمت الموافقة على Tocilizumab أيضًا في اليابان لعلاج مرض Castleman مع عدم وجود تأثيرات مناعية.
الرد: شكرا لك ستيفانو على هذه المعلومات.

السؤال: من Delphine Larrieu: هل ترى أي ضرر للحمض النووي ينخفض ​​عند العلاج بالبروجرينين في خلايا HGPS / نماذج الفئران HGPS؟
الجواب: لاحظنا أن الجينات المرتبطة بإصلاح الحمض النووي (BRCA1 ، Rad51 ، إلخ) قد تم تغييرها بعد العلاج بالبروجرينين.

السؤال: من دلفين لاريو: كيف يعمل البروجيرينين في ويرنر
المتلازمة التي - على حد علمي - لا تعبر عن البروجيرين؟ هل للجزيء أهداف أخرى؟
الجواب: يمكن أن تنتج خلايا WS أيضًا كمية صغيرة من البروجيرين مثل العمر الطبيعي
الخلايا. لاحظنا تعبير البروجيرين في خلايا WS عند مستويات الرنا المرسال.
نعتقد أن بروتين WRN يمكن أن يعمل على تثبيط البروجيرين. ومع ذلك ، في
حالة مرضى WS ، نظرًا لعدم وجود بروتين WRN ، فإن تعبير البروجيرين هو
يُعتقد أنه يحدث في العشرينات والثلاثينيات من القرن الماضي ، بقدر ما يظهر في العمر الطبيعي
الناس.

السؤال: من Bob Bishop: هل موقع ربط البروجيرين محدد كيميائيًا حيويًا أم
هيكليا؟ هل هناك اختبار كيميائي حيوي لإيجاد مركبات إضافية
بهذه الآلية؟
الجواب: أجرينا مقايسة المنسدلة حبة البيوتين أفيدين ولاحظنا
تفاعل محدد من البيروجرينين مع البروجيرين ولكن ليس مع لامين أ ، لامين
ب ، ص 53 ، أو يخرج.
قمنا أيضًا بتجربة اختبار إليسا لإيجاد مركبات إضافية يمكن أن تفعل ذلك
أن تكون مثبطات مفترضة لربط البروجيرين / لامين أ. تم تحضين البروتين المؤتلف Progerin بالتتابع مع مكتبة كيميائية و lamin A.
ومع ذلك ، كان البروجيرينين أكثر المواد الكيميائية فعالية في المادة الكيميائية
مكتبة.

السؤال: من جون كوك: تقدم عظيم دكتور كيم. هل يقلل البروجيرينين من
إفراز السيتوكينات SASP؟
الجواب: لاحظنا أن البروجيرينين يمكن أن يقلل من التعبير عن IL6 و IL8 في
خلايا HGPS.

السؤال: من سوزان ميكايليس: هل البروجيرينين متاح للباحثين؟
الجواب: بالطبع ، هو متاح إذا طلبت.

السؤال: من Thomas W Glover: ربما أكون قد فاتني ولكن ما هو رأيك هو
الآلية المسؤولة عن التأثيرات المفيدة في متلازمة ويرنر؟
الجواب: تنتج الخلايا المشتقة من مرضى WS أيضًا كمية صغيرة من البروجيرين ، مثل
بقدر الخلايا الطبيعية المستمدة من كبار السن. يمكن أن يكون البروجيرينين أيضًا
فعال في خلايا WS عن طريق تقليل تعبير البروجيرين.

الجواب: شكرا على السؤال: لا ، ليس التهاب بحد ذاته. ترتبط جزئيًا بالالتهاب ، وقد درسنا البلاعم في هذا المشروع ووجدنا أن الضربة القاضية ايكمت في زيادة تدفق الكوليسترول الضامة ، سواء القاعدية أو ApoAI- و HDL المحفز. نظرًا لأن هذا التأثير يرتبط أحيانًا بزيادة نقل الكوليسترول العكسي في الجسم الحي ، نود تحديد ما إذا كان ايكمت تثبيط من شأنه أن يقلل من تطور تصلب الشرايين.

السؤال: من vandres: هل جربت تصحيح الحمض النووي في الخلايا الليفية HGPS البشرية من مختلف الأعمار (في المختبر) واختبرت تطبيع النمط الظاهري الخاص بهم لمعرفة ما إذا كان يتناقص مع تقدم عمر الخلايا؟
الجواب: لا ، لم نجرب التصحيح في الخلايا الليفية من مرضى من مختلف الأعمار - فقط من مريضين مختلفين ، مما أسفر عن نتائج مماثلة.

السؤال: من Delphine Larrieu: تأثيرات مذهلة! هل تتوقع بروجيرين KO الكامل في الفئران متغايرة الزيجوت؟
الجواب: في الماوس ذي النسخة المفردة ، لا أتوقع بالضرورة كفاءات تحرير مختلفة كثيرًا عما نلاحظه حاليًا ، حيث يجب أن يكون هناك بالفعل فائض من عامل التحرير لكل progerin.

السؤال: من Andre Monteiro Da Rocha: هل تعتقد أن إعادة برمجة نسبة منخفضة من الخلايا يمكنها إصلاح وظيفة الخلايا الجذعية ، ولكنها قد تؤدي إلى استنفاد الخلايا الجذعية البالغة؟
الجواب: ليس لدينا أي بيانات يمكن أن تقدم إجابة على هذا السؤال.

السؤال: من Mei: تبدو مثل cardiomyocyte ، تلطيخ جميل!
من Abby Buchwalter: هل يعطل التعبير السلبي السائد Sun1 جميع مجمعات LINC ، بما في ذلك تلك التي تتوسط فيها Sun2؟
الجواب: نعم ، هناك دليل على ذلك في المختبر في أن جميع Nesprins في شمال شرق يمكن إزاحتها عن طريق DNSUN1

السؤال: من Suet Nee Chen: كيف وما هي الآلية التي يمكن لـ AAV9-SunDn أن يكون لها تأثيرات طويلة المدى؟ في أي عمر حقنت AAV9-Sun1DN في الفئران المتحولة LMNA؟
الجواب: لقد قمنا بحقن DNSUN1 AAV بعد يوم واحد من تحفيز recombinase Cre لحذف laminA. لدينا بيانات تفيد بأن DNSUN1 الذي قدمته AAV يستمر في التعبير عنه في خلايا عضلة القلب بعد عام من الحقن. نحن نجري تجارب الجرعة / التوقيت / الاستجابة الآن بعد أن عدنا إلى المختبر ويمكننا صنع AAV الخاص بنا بكميات كافية

السؤال: من Martin Bergö ، Viceordförande Kommittén för forskning: ما رأيك في المساهمة النسبية لغياب lamin A مقابل lamin C في تجارب Lmna بالضربة القاضية؟
الجواب: لست متأكدًا من ذلك ، لكن Sun1 تتفاعل مع LaminA وفي فئران HGPS ، يجب أن تكون المساهمة كلها LaminA (التي يُشتق منها البروجيرين)

السؤال: من jcampisi: ما سبب الوفاة في SUN1 KO أو hets؟
الجواب: سؤال جيد ما زلنا لا نعرفه ولكن نشك حاليًا في بعض مجموعات العضلات الهيكلية نحتاج إلى تحليل مرضي للنسيج المرضي للفئران المحتضرة

السؤال: من Tom Misteli: Colin: هل رأيت تغيرات في مسارات استجابة الإجهاد الخلوي في حيوانات Lmna / Sun؟
الجواب: لم نقم بعد بقياس أي جينات / علامات للاستجابة للتوتر في هذه الفئران

سؤال: من Delphine Larrieu: هل تتخيل استهداف القلب فقط باستخدام DNSUN1 في مرضى HGPS؟
الجواب: هذا ممكن بالنظر إلى النمط المصلي واستخدام محفز محدد لخلايا عضلة القلب. هذه التجارب قيد التقدم حاليًا

السؤال:من Yuexia Wang: لماذا يكون KO SUN1 أقل فائدة على الفئران المتماثلة اللواقح G609G؟
الجواب: ربما لأن الفئران متجانسة الزيجوت تعبر عن المزيد من البروجيرين. نرى تأثير استجابة فعل متغاير الزيجوت مقابل متجانسة الزيجوت في تجاربنا الجينية

السؤال:من Roland Foisner: مرحبًا كولن ، حديث لطيف. ما هو التأثير السلبي لـ SUN1 المنتظم في HGPS. رولاند
الجواب: ربما زاد ارتباط شبكة الترجمة الآلية بمجمع LINC. تؤثر زيادة تعبير Sun / Nesprin في خلايا المزارع على تحديد المواقع النووية وهجرة الخلايا

شرف لقاء عائلة باسو وبيراوت. شكرا لتقاسم رحلتك. أنت حقًا والإلهام!

شكرًا لعائلة سامي وألكسندرا على مشاركتهم في ورشة العمل ومشاركتهم رحلتك الملهمة مع بروجيريا!

تقدم رائع إيغر مع الموافقة في الأفق.

هل يمكننا تمديد هذه الجلسة حتى نهاية الأسبوع ومواصلة المناقشة؟ (شكرا لكم جميعا!) 

كانت ورشة العمل هذه رائعة. أهنئ PRF لالتزامه بالقيام بهذا النشاط العظيم. بلا شك ، لقد ملأتني ورشة العمل هذه بالكثير من المعرفة لمستقبلي. كان رائع. معا سنجد العلاج!

أعجب دائمًا بالعلم المثير في اجتماعات PRF. الكثير من المجد للمنظمين للحفاظ على تجربة ورشة العمل المجتمعية حتى في هذا الشكل الافتراضي!

لكم جميعا روك !!! شكرًا على هذه الفرصة الرائعة ، التفكير منذ سنوات عديدة ، والآن أصبح الأمر أشبه بالعيش في المستقبل! سعيد لكوني جزء منه

أفتقد جيتار دكتور كولين. عمل عظيم!

شكرًا جزيلاً على تنظيم هذا ، حقًا أهم حدث في أسبوعي!

شكرًا للجميع ونراكم شخصيًا العام القادم في كامبريدج !!

 شكرا لكم جميعا على حضوركم معنا!